Anewex RNA cleanup kit
Anewex RNA cleanup kit
ANX210506 English
For RNA cleanup and concentration with small elution volumes
50 Anewex RNA cleanup mini spin columns, collection tubes (1.5 mL and 2 mL), RNase-free reagents and buffers
製品詳細
Anewex RNA cleanup kitは事前に精製(フェノール/クロロホルムによる)されたRNAに含まれる酵素反応物質(増幅または標識反応物質、DNase消化酵素など)を、簡単で迅速な方法で除去します。
・高品質の total RNA精製がわずか数分で可能
・あらゆるダウンストリームアプリケーションで高性能を実現する ready-to-use RNA
・フェノール/クロロホルム抽出、CsClグラジエント、LiCl、エタノール沈殿は行いません
・ RT-PCR阻害剤の完全な除去
適用
Anewexの技術で分離されたRNAはA260 / 280比:1.9〜2.1、A260 / 230: であり、あらゆるダウンストリームアッセイに適用できます。
- RNA-seq
- Quantitative, real-time RT-PCR
- End-point RT-PCR
- Northern, dot, and slot blotting
- Array analysis
- Poly A + RNA selection
プロトコール
- 1.5mLチューブにRNAを用意し、2倍量のRCBを添加(例:RNA50μLに対しRCB 100µL)する。
- よく混合し、 2mL collection tubeにセットされたRNA cleanup スピンカラムに移す
- ふたをやさしく閉じ、10,000rpm以上で15秒遠心し、落下液を捨てる。
- 300μLのRCW1をスピンカラムにのせる。
- ふたをやさしく閉じ、10,000rpm以上で15秒遠心し、落下液を捨てる。
- 500μLのRCW2をスピンカラムにのせる。
- ふたをやさしく閉じ、10,000rpm以上で15秒遠心し、落下液を捨てる。
- 新しい1.5mLコレクションチューブにRNA cleanup スピンカラムをセットする。スピンカラムメンブレンの中央に RNase-free water 15mLをのせる。
- やさしくふたを閉じ、最高速度で1分間遠心しRNAを溶出する。RNase-free water 10μL未満では溶出しないでください
データと数値のサポート
リアルタイムRT-PCRやRNA-Seqなどのアプリケーションの効率は、使用するRNAサンプルの純度に大きく依存します。 RNAの純度を評価するために、260nmでのRNAの吸光度と280nmまたは230nmでの潜在的な汚染物質の吸光度を分光測定(例:Nanodrop)で測定しました。 高純度のRNAの指標としてはpH7.5でA260 / A280比1.8~2.1の値が広く受け入れられています。また、 A260 / A230比が2.0付近またはわずかに高い値となります。抽出されたRNAにAnewexRNAクリーンアップキットを使用した際のA280 / A260およびA230 / A260は、A280 / A260では1.7から1.96に、A280 / A260では0.65から2.17に大幅に改善されました。
Fig. 1: グアニジンチオシアン酸塩/フェノール/クロロホルムを使用して高脂肪食肝臓組織から抽出されたRNAの品質は、NanoDrop によって測定されました。
Fig. 2: Anewex RNA クリーンアップキットを使用してクリーンアップされたRNAの品質は、NanoDrop によって測定されました。